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氨基酸总量测定原理

来源:化工产品网-原创 发布时间:2024-01-05 23:02:57
氨基酸总量测定原理

氨基酸是构成蛋白质的基本组成单位,因此在生物分子学和生物化学领域中它们非常重要。测定氨基酸总量的原理是基于氨基酸的特性和化学反应。

氨基酸总量测定的原理基于氨基酸与二硫代磷酸(DTNB)发生反应的特性。DTNB是一种化学试剂,它能与氨基酸中的巯基(-SH)发生反应,形成黄色的二硫代磷酸巯基(TNB)产物。

在氨基酸总量测定中,可以通过将待测样品与碱性水解剂混合,将蛋白质水解成氨基酸。然后将氨基酸与DTNB混合,在碱性条件下反应。反应产生的黄色产物可以通过分光光度计进行测定,根据产物的吸光度可以计算出初始氨基酸的浓度。

需要注意的是,由于不同的氨基酸在与DTNB反应时产生的产物吸收光谱不同,因此需要进行校准。通过使用标准氨基酸来制备标准曲线,可以根据生物样品中产生的产物吸收光谱与标准曲线进行比较,从而计算出样品中氨基酸总量。

总之,氨基酸总量测定的原理是通过氨基酸与DTNB发生反应,形成可检测的产物来测定样品中氨基酸的总量。这种测定方法广泛应用于生物化学和生物分子学领域,有助于研究蛋白质的结构和功能。


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