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瑞氏染色步骤正确顺序

来源:化工产品网-原创 发布时间:2024-03-06 01:26:32
瑞氏染色步骤正确顺序

瑞氏染色是一种常用的染色技术,主要应用于细胞学和组织学研究中。正确的瑞氏染色步骤顺序对于获得高质量的染色结果非常关键。下面是瑞氏染色的正确步骤顺序。

1. 固定组织样本:首先,需要用4%的多聚甲醛(paraformaldehyde)或10%的中性缓冲福尔马林(neutral buffered formalin)来固定组织样本。这一步是为了保护组织样本的形态结构和细胞膜完整性。

2. 清洗样本:将固定的组织样本从甲醛或福尔马林中取出,用PBS缓冲液或去离子水洗涤样本。这一步是为了去除固定剂和其他污染物。

3. 预处理样本:用0.5%的Triton X-100或其他离子表面活性剂预处理样本。这一步是为了使细胞膜通透性增加,有利于染料的进入。

4. 瑞氏染色:将组织样本放入瑞氏染色缓冲液中,将其在60°C恒温水浴中孵育1-2小时,直到染料完全进入细胞核中。瑞氏染色缓冲液的配方包括核蛋白酸染料,如苏丹黑B和亚甲基绿,以及酸碱平衡剂。

5. 停止染色反应:将组织样本从瑞氏染色缓冲液中取出,用去离子水冲洗样本。然后,用不同浓度的酒精(如70%、80%、95%、100%)进行脱水。

6. 清洗样本:将组织样本用透明剂如xylene或苯清洗,以去除脱水剂。

7. 封片:将组织样本放入适当的介质中(如Canada Balsam),并使用载玻片覆盖物密封。

总之,正确的瑞氏染色步骤顺序可以获得高质量的染色结果,这对于细胞学和组织学研究非常重要。


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